Меню

Оборудование для культивирования клеток и эмбрионов микроскопии микроманипуляций

Оборудование для культивирования клеток и эмбрионов, микроскопии, микроманипуляций

Краткое описание: Инкубатор MCO-18M обеспечивает оптимальные параметры уровня влажности и температуры, а также содержания углекислого газа и кислорода в воздушной среде для создания оптимальных условий культивирования эмбрионов млекопитающихТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для культивирования клеточных культур, для роста которых необходим повышенный уровень СО2. Поддерживает уровень CO2 во внутренней атмосфере в пределах от 0 до 20%.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Инкубатор СО2 MCO-18AIC предназначен для культивирования половых и соматических клеток при заданных параметрах процентного содержания углекислого газа, уровня влажности и значения температуры, то есть в условиях, максимально приближенных к условиям in vivo. Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Прямой микроскоп нового поколения Axio Imager.М2 предназначен для визуализации, а также создания, хранения и обработки изображений клеток и эмбрионов с использованием светлого поля, флуоресценции, дифференциально-интерфазного контраста (контраста Номарского). Моторизованные компоненты микроскопа совместно с интеллектуальными управляющими модулями повышают достоверность и воспроизводимость результатов, а также позволяют автоматизировать рутинные процессы правильной настройки микроскопа.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Микроскоп Eclipse Ti-U предназначен для инвертированной микроскопии биологических объектов; обеспечивает оптимальное качество микроскопии в светлом и темном поле, флуоресцентной микроскопии, фазового контраста, ДИК и модуляционного контраста.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для микроскопии биологических объектов. Обеспечивает оптимальное качество микроскопии в светлом и темном поле, флуоресцентной микроскопии, фазового контраста, ДИК и модуляционного контраста. Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Предназначен для инвертированной микроскопии биологических объектов; обеспечивает оптимальное качество микроскопии в светлом и темном поле, флуоресцентной микроскопии, фазового контраста.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Предназначен для микроскопии биологических объектов; обеспечивает оптимальное качество микроскопии в светлом и темном поле, флуоресцентной микроскопии, фазового контраста. Микроскоп оборудован системой для фотосъемки биологических объектов (цифровая цветная камера puA2500 с комплектом, Россия)Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для микроскопии биологических объектов. Обеспечивает оптимальное качество микроскопии в светлом и темном поле, флуоресцентной микроскопии, фазового контраста, ДИК и модуляционного контраста. Микроскоп дообуродван объективом CFI Plan Apochromat (Nikon, Япония) и камерой цифровой цветной асА192040 (ООО «Альтами», Россия) для визуализации изображенийТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для микроскопии биологических объектов в светлом и темном поле, флуоресцентной микроскопии, фазового контраста.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для микроскопии биологических объектов в светлом и темном поле, флуоресцентной микроскопии, фазового контраста.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Предназначен для микроскопии биологических объектов; обеспечивает оптимальное качество микроскопии в светлом и темном поле, флуоресцентной микроскопии, фазового контраста. Микроскоп оборудован модулем эпи-флуоресцентным (Nikon, Япония) и цифровой камерой цветной охлаждаемой (Nikon, Япония)Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Предназначен для наблюдения объемного изображения предметов в отраженном или проходящем светеТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Стериомикроскопы CZM-2T предназначены для исследования непрозрачных объемных объектов (ооцитов и эмбрионов) в отраженном свете. Особенностью данной модели является наличие тринокуляра позволяющего использовать фотокамеруТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Представляет собой прозрачную пластинку из оптического стекла, предназначенную для подогрева рабочей поверхности стереомикроскопов до требуемых температурТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Инвертированный микроскоп DIAPHOT (Nikon, Япония), дообрудованный столиком подогреваемым MATS-CKTS (Tokai Hit, Япония). Микроскоп оборудован фазово-контрастным устройством, которое обеспечивает освещение объектов с применением методов фазового контраста, и подогреваемым столиком MATS-CKTS (Tokai Hit, Япония), предназначенным для подогрева рабочей поверхности инвертированных микроскопов до требуемых температурТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Микроскоп A Aхiovert 40 CFL для исследования биологических объектов, обордованный цветной камерой MMC-14C-S (MMSSoft, Россия) на ПЗС сенсоре 2/3″ Sony EXview HAD (патентованная технология компании Sony, позволяющая увеличить светочувствительность ПЗС сенсора за счет включения ближней инфракрасной области спектра и уменьшить шумы от темнового тока камеры). Сочетает в себе сверхвысокую чувствительность и отличную цветопередачу. Особенно эффективны при использовании для съемки флуоресцентных препаратов слабого свечения.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Ламинарные шкафы II класса защиты (защита продукта, защита оператора) для работы с культурой клеток, эмбрионовТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Ламинарные шкафы II класса защиты (защита продукта, защита оператора) для работы с культурой клеток, эмбрионовТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Ламинарные шкафы II класса защиты (защита продукта, защита оператора) для работы с культурой клеток, эмбрионовТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Подогреваемая столешница в комплекте со стереомикроскопом предназначена для проведения манипуляций с ооцитами и эмбрионами животных в условиях физиологически уместных стабильных температур. Универсальный стереоскопический микроскоп SMZ800N фирмы Nikon используют для исследования непрозрачных объемных объектов (ооцитов и эмбрионов) в отраженном свете. Он обеспечивают объемное (стереоскопическое) изображение при больших фокусных расстояниях, характеризуются небольшим увеличением и большим полем зрения. Кроме того, оптическая система стереоскопического микроскопа не «переворачивает» изображение. Это делает его незаменимым для препарирования объектов вручную. Отличительной особенностью стереомикроскопа является, большое увеличение, высокий коэффициент трансфокации и высокое разрешение.Технические характеристики: Ссылка1, Ссылка2

Краткое описание: Микрокузница предназначена для изготовления из стекла различных микроинструментов, необходимых для проведения микрохирургических исследований.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Система для прижизненного получения яйцеклеток от коров и телокТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для проведения микроманипуляций. Включает 2 масленных микроинжектора IM-9В в комплекте держателями капиляров. Используется в комплекте с инвертированным микроскопом DIAPHOT (Nikon, Япония) Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для проведения микроманипуляций. Включает 3D гидравлический микроманипулятор с висячим джойстиком MMO-202ND и «грубый» микроманипулятор MMN-1Технические характеристики: Ссылка1, Ссылка2

Краткое описание: Ручной масляный инжектор в комплекте с универсальным держателем капилляров (наружный диаметр 1 мм) для микроинъекций. Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Представляет собой систему для проведения электропорации и электрослияния эукариотических клеток. Технология SoftPulse позволяет применять максимально короткие импульсы (в пределах микросекунд), что сохраняет жизнеспособность клеток. Соответствующие параметры напряжения и продолжительность импульсов устанавливается не зависимо от сопротивления образца. Система комплектуется различными камерами, включая микрокамеру для слияния комплексов ооцит/соматическая клетка.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Система трансфекции для быстрой и эффективной доставки нуклеиновых кислот во все типы клеток млекопитающих, включая первичные, стволовые и труднотрансфицируемые клетки (DTTC).Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Программный замораживатель предназначен для криоконсервации биологических объектов (эмбрионов) в жидком азоте. Представляет собой модульную систему, состоящую из 3 частей: термоконтроллера CL-8800, криокамеры и криованны из пенопласта. Криокамера находится прямо в жидком азоте в криованне и присоединена к термоконтроллеру, который регулирует температуру образца. Система позволяет проводить замораживание эмбрионов, как с использованием стандартных программ (протоколов), так и устанавливать параметры охлаждения самостоятельно. Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для криоконсервации генетического материала (сперма, эмбрионы) животных. Включает сосуды Дьюара, замораживатель для спермы и эмбрионов, запиватель для соломинокТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для криоконсервации биологического материала (сперма, эмбрионы) животных.Технические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Программный замораживатель предназначен для криоконсервации биологических объектов (ооцитов, спермы, эмбрионов, зигот. соматических клеток) в жидком азоте. Представляет собой модульную систему, состоящую из 3 частей: термоконтроллера CL-2200, криокамеры и металической криованны. Криокамера находится прямо в жидком азоте в металической криованне и присоединена к термоконтроллеру, который регулирует температуру образца. Система позволяет проводить замораживание как с использованием 8 различных программ (протоколов), так и устанавливать параметры охлаждения самостоятельно. Никакой специальной инсталляции не требуется: модуль может быть легко собран или разобран пользователемТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для получения криостатных гистологических срезов различных органов и тканей животныхТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для получения гистологических срезов различных органов и тканей животныхТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Оборудование для получения гистологических срезов различных органов и тканей животныхТехнические характеристики: Ссылка

Краткое описание: Представляет собой прозрачную пластинку из оптического стекла, предназначенную для подогрева рабочей поверхности стереомикроскопов до требуемых температурПланируется доукомплектация стериомикроскопом SMZ800 (Nicon,Япония)Технические характеристики: Ссылка

Источник



Системы для культивирования клеток FiberCell

Подразделы

Насосный модуль Duet

Пустотелые волоконные картриджи Hollow Fiber

Крышки для бутылей и резервуаров

Замена сыворотки «CDM-HD»

Компания FiberCell Systems Inc. предлагает оригинальные простые в эксплуатации системы высокой эффективности для культивирования клеток. Системы FiberCell представляют собой микробиореакторы для культивирования клеток на пустотелых волокнах (Hollow Fiber). Системы FiberCell представляют собой абсолютно новый подход к процессу культивирования клеток, который уже завоевал признание в мире. Сердцем системы FiberCell является специальный картридж, заполненный пустотелыми волокнами (Hollow Fiber), обеспечивающими высокую эффективность процесса культивирования, что дает возможность исследователям в лабораториях и биотехнологическим компаниям получать количества клеток и клеточных продуктов, недоступные с помощью стандартных технологий.

Читайте также:  Российская компания пультовой охраны Гольфстрим спектр услуг и их стоимость

Вид системы FiberCell на полке СО2-инкубатора

  • Культивирование клеток;
  • Наработка рекомбинантных белков;
  • Наработка моноклональных антител;
  • Токсикологические исследования In Vitro;
  • Наработка секретома;
  • Культивирование эндотелиальных клеток;
  • И многое другое.

Культивирование клеток при высоких плотностях имеет следующие преимущества:

  • Сниженный расход сыворотки;
  • Простая адаптация к средам без сыворотки, включая фирменную среду «CDM HD» (Chemically Defined Medium – High Density serum replacement), являющуюся заменой сыворотки;
  • Увеличенная концентрация секретируемого продукта (в 10 – 100 раз);
  • Максимально-близкие условия к условиям роста клеток in vivo.

Схема функционирования картриджа Hollow Fiber

Система FiberCell включает в себя специальный спроектированный насосный нагнетательный модуль «Duet» и картриджи типа «Hollow Fiber» с соответствующей обвязкой. Система FiberCell является простым в эксплуатации и экономичным, но в то же время эффективным средством для реализации всех преимуществ культивирования клеток в волоконных картриджах в любой лаборатории. Система FiberCell, включая насосный модуль Duet и картриджHollow Fiber, легко помещается в стандартный СО2-инкубатор, что дает контроль температуры и контроль состава газовой смеси. Картриджи в любой момент могут быть легко и быстро отсоединены от насоса для дальнейших манипуляций с ними в условиях ламинарного шкафа.

Насосный модуль Duet

Насосный модуль Duet дает возможность гибко регулировать скорость потока среды для всех систем FiberCell и для всех типов картриджей Hollow Fiber. Насосный модуль Duet обеспечивает постоянный поток, необходимый для бесперебойной подачи питательных компонентов и для постоянной оксигенации культивируемых культур. В насосном модуле Duet реализована уникальная технология перекачивающего действия методом позитивного вытеснения. Технология обеспечивает свободное от какого-либо трения насосное действие, что предотвращает повреждение шлангов и забивание волокон картриджей микрофрагментами шлангов. Уникальная конструкция насосного модуля Duet позволяет организовать непрерывную эксплуатацию систем FiberCell в течение до двух лет. Насосный модуль Duet позволяет генерировать поток от 5 мл в минуту до 140 мл в минуту в зависимости от типа применяемого картриджа. Кислородопроницаемая петля силиконового шланга обеспечивает эффективный газообмен, при этом поддерживая систему в закрытом, биологически безопасном состоянии.

Ключевые преимущества систем FiberCell:

  • В процессе продуцирования осуществляется концентрирование секретируемых белков и антител до 100 раз и более в малом объеме межволоконного пространства;
  • Исключение необходимости дополнительных манипуляций с клетками, поскольку клетки распложены на пористой поверхности волокон;
  • Клеточные культуры могут существовать в стабильном состоянии в течение многих месяцев;
  • Обеспечены все условия для высокой жизнеспособности, жизнестойкости клеток;
  • Уменьшение степени протекания процессов апоптоза;
  • Улучшение ряда клеточных функций, включая фолдинг белков и посттрансляционные модификации;
  • Реализация гомеостатических условий существования клеточных культур, максимально приближенных к условиям In vivo;
  • Эффективный своевременный отвод ингибирующих цитокинов от клеток;
  • Максимальная биобезопасность в условиях «закрытой» системы;
  • Возможность работы с большим числом клеток (до 10 11 );
  • Исключение возникновения «мертвых зон» и неоднородностей внутри картриджа благодаря специальной структуре заполняющих его пустотелых волокон;
  • Универсальная оптимизация как для суспензионных, так и для прилипающих клеток;
  • Гибкий контроль над системой благодаря уникально гибкому регулированию скорости протока с помощью насосного модуля Duet;
  • Долгое время жизни картриджа (от нескольких недель до двух лет);
  • Эффективный обмен (подвод питательных компонентов, отвод отходов) благодаря уникальной структуре пустотелых волокон и реализованной схеме позитивного нагнетания с помощью насосного модуля Duet.

Более подробную информацию о системах для культивирования клеток FiberCell вы сможете найти в разделе «Полезная информация»: «Основные применения и преимущества систем для культивирования клеток FiberCell от компании FiberCell Systems Inc.»

Источник

Технологии и оборудование, применяемые при культивировании клеток из тканей человека

Для исключения микробиологического и механического загрязнения все работы с биоматериалом ведутся в стерильных условиях. С этой целью используются ламинарные укрытия (защита продукта) либо боксы биологической безопасности (защита продукта, оператора и окружающей среды). Современное высокотехнологичное оборудование данного предназначения производит российская компания «Ламинарные системы».

Ламинарный бокс с вертикальным нисходящим потоком воздуха предназначен для создания беспылевой абактериальной среды

Клеточные культуры обычно выделяют из эмбриональных тканей. Связано это с тем, что изолированные эмбриональные клетки лучше выживают, активнее растут и отличаются более низким уровнем специализации по сравнению с клетками взрослых тканей.

Культивирование осуществляется в два этапа. На первом из них получают так называемые первично-трипсинизированные культуры. С этой целью последовательно выполняют ряд операций.

Изоляция и измельчение (механическая дезагрегация) фрагмента ткани с последующим отмыванием и обеззараживанием эксплантов

Если стоит задача получения культуры клеток из жировой ткани, образец рекомендуется извлекать непосредственно при препарировании.

При измельчении образца из ткани любого типа важно пользоваться максимально острыми инструментами для уменьшения процента поврежденных клеток.

Отмывание и обеззараживание готовых эксплантов производится с помощью используется раствор Хенкса, в который добавляют антибиотики.

Ферментативная дезагрегация

В некоторых случаях клетки способны самостоятельно мигрировать из эксплантов, но чаще требуется их освобождение с помощью ферментов. Выбор ферментов зависит от типа ткани. Для этих целей могут быть использованы как препараты грубой очистки (неочищенные), так и очищенные.

Неочищенные ферменты действуют более эффективно за счет присутствия примесей других протеаз. Очищенные препараты используют тогда, когда необходимо их специфическое действие либо требуется уменьшить токсичность среды для ферментации.

Наиболее эффективно работают, но, в то же время, часто повреждают клетки проназа и трипсин. Наиболее мягким действием обладают диспаза и коллагеназа, однако дезагрегация этими препаратами зачастую бывает неполной.

Трехместная магнитная мешалка с подогревом

Различные ферменты могут применяться как изолировано, так и в комплексе. Выбор конкретных препаратов зависит от особенностей получаемых клеток и тканей.

Так, например, для разрушения межклеточного матрикса в хрящевых тканях используют трипсин либо гиалуронидазу и коллагеназу.

Для удаления высвобожденной из лизированных клеток ДНК, которая мешает дезагрегации и способствует реагрегации, в среду для ферментации добавляют ДНКазу.

Обработка трипсином проводится при комнатной или повышенной до 37C температуре. Увеличить интенсивность разрушения межклеточных перегородок позволяет использование специальных смесителей или электромагнитных мешалок, которые могут быть одноместными и многоместными, с подогревом и без подогрева. Весь процесс занимает от 10 до 30 минут.

Центрифугирование клеточной суспензии

Полученную после дезагрегации суспензию фильтруют для освобождения от крупных фрагментов и тканевых волокон, а затем подвергают мягкому кратковременному центрифугированию. Скорость вращения ротора устанавливается в диапазоне от 800 до 1000 об/мин, конкретные значения выбираются с учетом типа обрабатываемого материала.

В линейку центрифуг для лабораторий производства британской компании входят приборы исследовательского класса, способные работать в широком диапазоне скоростей и обеспечивающие возможность оптимизации режима центрифугирования под конкретные задачи, в том числе – для фракционирования клеточной суспензии без повреждения компонентов.

Исследовательская центрифуга К1015 может быть использована для мягкого центрифугирования

К таким аппаратам, в частности, относятся исследовательские микроцентрифуги K 1015, наделенные:

  • функцией автоматического распознавания модели ротора,
  • возможностью выбора оптимального режима разгона и торможения из 10 предустановленных,
  • поддержкой гибкой регулировки скорости с шагом 1 об/мин.

108 ячеек памяти прибора позволяют хранить соответствующие количество режимов центрифугирования, что особенно удобно при широком спектре решаемых задач.

Ресуспендирование и перенос в матрацы

После центрифугирования надосадочная жидкость сливается, а образовавшийся осадок вновь промывается раствором Хенкса.

Готовые среды для выращивания клеточных культур

К отмытым клеткам добавляется питательная среда с тем расчетом, чтобы их концентрация в 1 мл достигала от 100 до 400 тысяч. Следует отметить, что концентрация клеток в первичных культурах всегда должна быть высокой, так как значительная часть их погибает.

Лучшие результаты получаются при использовании богатых питательных сред (Хэма f12 и др.) или ФБС. Простые среды, телячьи и лошадиные сыворотки работают хуже.

Читайте также:  Ремкомлект для сколов и трещин акриловых ванн Самоделкин

Разлитую в культуральные сосуды суспензию плотно закрывают пробками, взвесь термостатируют при температуре 37 °С.

Приготовление монослойной культуры

Клетки большинства нормальных тканей способны к выживанию и пролиферации лишь в том случае, если они смогут закрепиться на подходящем субстрате. Такие субстраты наносятся на стенки культуральных сосудов. Закрепившиеся на субстрате клетки, в среднем, в течение недели образуют плотный монослой. Его наличие, а также изменение цвета красителя-индикатора, свидетельствуют о том, что первичная культура готова, и ее пора рассеивать.

Пересев клеток

Для начала клетки необходимо отделить от поверхности субстрата. С этой целью из культурального сосуда удаляют ростовую среду, заменяя ее раствором трипсина, подогретым до температуры тела (35-37°C).

Через 3-5 минут трипсин сливают и дожидаются, когда набухшие клетки полностью отделятся от матрицы. Затем в сосуд добавляется свежая питательная среда. Часть взвеси (четверть либо половина) переносится в новый сосуд. Данная процедура называется пассированием. Ее можно повторять несколько раз (до 50-ти пассажей включительно) без изменений структуры и свойств клеток.

При этом формируются клеточные культуры ограниченного роста, которые сохраняют способность к делению в течение различного периода времени. К таким клеточным линиям, в том числе, относятся диплоидные штаммы, обычно используемые для приготовления вакцин.

Каждый диплоидный штамм выдерживает несколько десятков пересевов, однако максимальная активность пролиферации наблюдается, начиная от 5-го и заканчивая 20-м пассажем.

Шейкер-инкубатор SI500 с принудительной циркуляцией воздушных потоков

После определенного количества пассажей диплоидные штаммы дегенерируют либо превращаются в постоянную клеточную линию, изменяя свои ростовые свойства. При этом в культуре возрастает число гетероплоидных клеток.

Культивирование опухолевых клеток с получение суспензионных клеточных линий

В отличие от клеток здоровой ткани, клетки опухоли часто способны к пролиферации непосредственно в жидкой среде с получением клеточной линии в виде суспензии. Такие клеточные линии получают, встряхивая образец с частотой 100-200 об/мин. Для этих целей идеально приспособлены шейкеры-инкубаторы марки Stuart.

«АГ Аналитэксперт» представляет современные настольные центрифуги производства компании «Centurion Scientific» специального и общелабораторного назначения. Широкий модельный ряд включает как специализированные устройства, так и универсальные лабораторные центрифуги, совместимые с большим количеством сменных роторов различного объема. Если у Вас возникла потребность купить надежную центрифугу европейского качества, свяжитесь с нами, мы будем рады Вам помочь!

Источник

Аппараты для массового культивирования клеток. Типы, режимы работы и возможности использования для культивирования клеток.

В зависимости от конструктивных решений, объемов и других характеристик биореакторы делят на группы.

На основе рабочего объема биореакторы делятся на лабораторные (их емкость 0,5-100 л), пилотные (100 л -10 м3) и промышленные (10-100 м3). Во всех случаях питательной средой заполняется не более 75 % объема сосуда.

Все биореакторы могут быть разделены по используемому принципу культивирования на закрытые и открытые. В закрытых биореакторах осуществляют периодическое культивирование, иногда его называют накопительным культивированием.

По способу подачи воздуха в биореакторих можно разделить на 2 типа:

без подводки стерильного воздуха (в таких биореакторах культивируют анаэробные микроорганизмы);

с подводкой стерильного воздуха (их используют для культивирования аэробов). Аэрация жидкости в биореакторах может обеспечиваться механическими мешалками или потоком воздуха.

Ферментеры можно подразделить в зависимости от системы перемешивания на три основные группы : аппараты с механическим,

Биореакторы с механическим перемешиванием характеризуются тем, что воздух подают под давлением через распределитель, представляющий собой кольцо с множеством маленьких отверстий. При этом образуются мелкие пузырьки воздуха и за счет механического перемешивания, обеспечивается их равномерное распределение внутри аппарата. Для этой же цели используются мешалки, которые, разбивая крупные пузырьки воздуха, разносят их по всему реактору. Эффективность распределения воздуха зависит от типа мешалки, числа ее оборотов и физико-химических свойств используемой среды. При интенсивном перемешивании часто случается вспенивание, поэтому рабочий объём биореакторов такого типа не превышает 55 %.

Биореакторы с барботажной системой воздухораспределения характеризуются тем, что перемешивание в них осуществляется восходящими потоками воздуха, который подают под высоким давлением в нижнюю часть биореактора через барботеры, представляющие собой воздушные трубы с отверстиями диаметром 0,1-0,2 мм. Подача воздуха под сильным давлением приводит к сильному пенообразованию, поэтому рабочий объем биореакторов такого типа также не превышает 55 %.

Биореакторы с эрлифтной системой воздухораспределения характеризуются тем, что воздух подают через центральную трубу, которая обеспечивает внутреннюю циркуляцию жидкости, либо за счет внешней системы циркуляции, которая осуществляется также с помощью труб, установленных снаружи аппарата.

По конструкции биореакторы классифицируются следующим образом:

реакторы емкостного типа;

реакторы типа колонны;

реакторы трубчатого типа;

реакторы пленочного типа;

реакторы мембранного типа;

реакторы с псевдоожиженным слоем.

Конструктивный тип реактора зависит от условий проведения процесса и свойств участвующих в нем компонентов.

Классификация ферментеров по способу подвода энергии:

Ферментеры с подводом энергии газовой фазой (группа ФГ). Их общий признак – подвод энергии в аппарат через газовую фазу, которая является ее носителем. Ферментеры характеризуются достаточно простой конструкцией (отсутствуют трущиеся, движущиеся узлы), высокой эксплуатационной надежностью, но имеют не очень высокие массообменные характеристики. Данные аппараты представляют собой вертикальную емкость, снабженную газораспределительным устройством одного из известных типов.

К таким аппаратам относятся, например, барботажные и эрлифтные ферментеры.

Ферментеры с вводом энергии жидкой фазой (группа ФЖ) наиболее сложны по конструкции и энергоемки, но обеспечивают наиболее высокие по сравнению с группой ферментеров ФГ значения коэффициента массопередачи кислорода.

В данных аппаратах ввод энергии осуществляется жидкой фазой, обычно самовсасывающими мешалками или насосами; в последнем варианте жидкость вводится в аппарат через специальное устройство (сопло, эжектор, диспергатор). Данные аппараты также можно подразделит на типы:

ферментеры с самовсасывающими мешалками не требуют специальных воздуходувных аппаратов, так как поступление в них воздуха происходит в результате разрежения в воздушной камере мешалки, соединенной с воздуховодом и с жидкостью, отбрасываемой лопатками мешалки;

в эжекционных ферментерах возможна рециркуляция газовой фазы, что экономит субстрат, однако требуется наличие специальных насосов для перекачки газосодержащей культуральной среды.

Применение эжекционного ввода газовых субстратов в ферментер может интенсифицировать массообмен на порядок;

струйные ферментеры (с затопленной или падающей струей) оборудуются мощными насосами, которые забирают культуральную жидкость из нижней части аппарата. Струя жидкости под давлением свободно падает сверху и пронизывает аэрируемую жидкость до дна аппарата, интенсивно перемешивая жидкость. Внизу жидкость вновь засасывается насосом и снова подается вверх аппарата, то есть возникает замкнутый контур циркуляции.

Недостатком данных аппаратов являются потери энергии при перекачке жидкости, трудности проектирования в связи с отсутствием надежных методик расчета конструкций и режимов работы струйных и эжекционных устройств.

Третья группа аппаратов – с подводом энергии газовой и жидкой фазами (группа ФЖГ). Основными их конструкционными элементами являются перемешивающие устройства всех известных типов, обеспечивающие высокоэффективное диспергирование и гомогенизацию, а также наличие в совокупности насосов и перемешивающих устройств.

Это могут быть аппараты с группой самовсасывающих мешалок и насосом для перекачивания культуральной жидкости, высокоинтенсивные аппараты с механическим перемешиванием и одновременно барботажем сжатым воздухом и другие сочетания перемешивающих и аэрирующих устройств. Коэффициент массопереноса кислорода в таких ферментерах может в принципе иметь любые из известных значения.

Известны следующие основные типы аппаратов отечественного производства: барботажный (трубчатый и коробчатый), эрлифтный (типовой), эрлифтно-периферийный, эрлифтно-многозонный, многозонной конструкции, колонный, горизонтальный с самовсасывающими мешалками, эжекционный, дрожжерастильный и другие. Большинство перемешиваемых и аэрируемых культур во время роста образуют довольно много пены. Образование на поверхности среды культивирования слоя из пузырьков связано с наличием в среде поверхностно-активных веществ (ПАВ), Умеренное пенообразование способствует росту многих аэробных микроорганизмов (пенный слой – кислородный коктейль).

Особое внимание уделяется борьбе с избыточным пенообразованием, так как, если не препятствовать этому, пена смачивает фильтры для стерилизации воздуха, что приводит к контаминации культуры посторонней микрофлорой, уменьшению полезного объема биореактора, а также выходу пены наружу.

Контроль пенообразования осуществляется путем введения в сосуд специального датчика.

Читайте также:  Схема приготовления салата рыбного

Для борьбы с избыточным пенообразованием используется механическое и химическое пеногашение. При механическом пеногашении лопасти пеногасителя размещаются на валу мешалки. При химическом пеногашении в крышке сосуда предусматривается специальный ввод для реагента гашения.

Химические пеногасители более дешевы, их используют время от времени при необходимости подавления пенообразования. Однако при добавлении этих веществ может изменяться состав питательной среды.

Пеногасящие вещества растительного (кукурузное, касторовое, соевое, подсолнечное масло, масло из семян хлопчатника и другие) и животного (свиной, говяжий, бараний, китовый и другие жиры) происхождения могут служить микроорганизмам источником углерода и энергии и, следовательно, стимулировать их активное развитие. Однако известны случаи, когда природные пеногасители оказывали отрицательное действие на метаболизм клетки.

А такие неметаболизируемые пеногасители, как силиконы, в высокой концентрации токсичны.

Поэтому пеногасители, являющиеся поверхностно-активными веществами, следует использовать только в очень низких концентрациях и только после тщательной проверки. Пеногасители добавляют непосредственно в среду перед стерилизацией или в ферментер через специальный ввод.

Аппараты для анаэробных процессов достаточно просты и применяются в процессах конверсии растительного сырья, а также различных промышленных отходов.

При метановом брожении для получения биогаза, а также в ряде других процессов (получение ацетона, шампанских вин) используют ферментационные аппараты ( метанотенки).

Эти аппараты имеют различную конструкцию (от простой выгребной ямы до сложных металлических конструкций или железобетонных сооружений) и объемы (от нескольких до сотен кубометров). Метанотенки оборудованы системой подачи сырья, системой теплообменных труб для стабилизации температуры, несложным перемешивающим устройством для гомогенного распределения сырья и биомассы продуцента, газовым колпаком и устройством переменного объема ( газгольдер) для сбора образуемого биогаза.

5. Культуральная посуда. Особые требования к свойствам поверхности и материалу изделий из стекла и пластика. Специальная культуральная посуда. Области применения и возможность использования

Основная часть ассортимента специальной культуральной посуды предназначена для роста клеток в монослое, что определяет особые тре­бования к свойствам поверхности и материала изделий как из стекла, так и из пластика. Для культивирования клеток обычно используют флако­ны, колбы, матрасы, чашки Петри, платы, роллерные сосуды, пробирки, пипетки и т. д.

Посуда из стекла

Хотя в последние годы широко применяется пластиковая посуда од­норазового использования, посуда из стекла не утратила своего значе­ния благодаря ряду бесспорных преимуществ: хорошие адгезионные свойства поверхности, способствующие прикреплению клеток; много­кратность использования; биологическая инертность стекла ряда соста­вов; термостойкость и другие. Кроме того, в экспериментах с контроли­руемым уровнем кислорода необходимо пользоваться именно стеклян­ной посудой, т. к. в пластике кислород может растворяться. Помимо этого из пластика могут экстрагироваться водорастворимые органиче­ские соединения.

Для стеклянной лабораторной и культуральной посуды на практике в основном применяются два типа составов — многощелочное и малоще­лочное боросиликатное стекло типа «Пирекс». Щелочесодержащие си­ликатные стекла имеют недостаточную термостойкость и химическую устойчивость к воде, кислотам и щелочам. Алюмоборосиликатные ма­лощелочные стекла типа «Пирекс» характеризуются высокой устойчиво­стью к воде, устойчивостью к щелочным растворам и ко всем кислотам, за исключением плавиковой (фтористоводородной) и горячей фосфор­ной. Кроме того, стекла типа «Пирекс» обладают хорошими оптически­ми свойствами.

Существует также группа макропористых стекол, которые не исполь­зуются для изготовления посуды, но применяются при культивировании клеток в качестве микроносителей.

Однако успех в эксперименте обеспечивается не только качеством стекла, но и степенью подготовки лабораторной посуды. Посуда для культивирования должна быть чистой физически, химически и бакте­риологически.

Начиная с 1965 г. все большее применение в лабораторной практике находит пластиковая посуда одноразового использования. При работе с культурами клеток пластиковая посуда в отдельных случаях более при­годна из-за характерных особенностей некоторых клеточных линий. Та­кая посуда проста в использовании, т. к. выпускается в стерильном, гото­вом к работе виде. Стерилизация производится в процессе изготовления физическими (облучение УФ светом или гамма-лучами) или химически­ми (газы — окись этилена, жидкости — этиловый спирт, раствор пергидро­ля) способами. Пластиковая посуда производится в двух модификациях: для культивирования микроорганизмов и для культивирования клеток. Такое разделение вызвано тем, что культивируемые клетки (речь идет о монослойном культивировании) в отличие от бактериальных клеток на­ходятся в непосредственном контакте с поверхностью сосуда, которая является для них субстратом. Клетки оседают на этой поверхности, при­крепляются и распластываются. Для улучшения адгезионных свойств поверхности из полистирола ее подвергают специальной обработке, в то время как биологическая посуда не обрабатывается.

Таким образом, одним из первых условий успешного культивирова­ния клеток является хороший субстрат, т. е. посуда, обеспечивающая максимальную адгезию, распластывание и, следовательно, рост.

6. Аппараты для очистки воды, характеристика и возможности получения сверхчистой и общелабораторной воды. Приборы, аппараты иреактивы для мытья и стерилизации посуды.

Качество воды, используемой для приготовления питательных сред либо для мытья культуральной посуды, имеет важное значение. До не­давнего времени такая вода приготавливалась путем простой и двукрат­ной дистилляции питьевой воды. В настоящее время наряду с традици­онными широкое применение получили методы очистки воды путем ис­пользования физико-химических процессов обратного осмоса, ионного обмена и мембранной фильтрации. Водопроводная вода, используемая в качестве исходной и прошедшая в этих установках через очистку обрат­ным осмосом, поступает на фильтры из активированного угля, с них — на колонки с ионообменными смолами и затем — на мембранные фильтры с диаметром пор 0,22 мкм. При необходимости вода дополнительно под­вергается воздействию мощного потока УФ облучения.

Для очистки воды подобным способом наиболее часто применяются установки типа ОВ-1, состоящие из двух конструктивно самостоятельных частей, допускающих независимое использование, — ОВ-2 и ОВ-3. Уста­новка ОВ-2 осуществляет приготовление общелабораторной воды, пре­восходящей по качеству очистки дистиллированную воду. Установка ОВ-3 предназначена для получения пригодной для приготовления питательных сред сверхчистой из общелабораторной или дистиллированной воды.

Приборы и аппараты для мытья и стерилизации посуды

Приборы и аппараты для мытья и стерилизации посуды обеспечива­ют выполнение всех этапов технологического процесса: предваритель­ную стерилизацию посуды, поступающей из опыта, насыщенным водя­ным паром в паровых стерилизаторах (автоклавах); предварительное за­мачивание в водных растворах химических реагентов (5 % растворе ги- похлорита натрия, 3 % растворе перекиси водорода и т. д.); полоскание после замачивания холодной или слегка нагретой водой; мытье горячим раствором детергента с низким пенообразованием; вторичное полоска­ние горячей водой; финишное полоскание дистиллированной или обще­лабораторной водой; сушку в сушильных шкафах с принудительной продувкой горячим воздухом; упаковку и финишную стерилизацию в паровых или воздушных стерилизаторах.

Оптимальным вариантом для мытья посуды является использование автоматических моечных машин («Forma Scientific», «Miele», «Hotpack- Heinicke» либо отечественных машин типа P3-AMM).

Источник

Культивирование клеточных культур в физиологических условиях

Вы здесь

Станции для культивирования клеточных культур, которые позволяют создавать необходимые физиологические условия для вашего эксперимента. Постоянный контроль параметров среды дает вам уверенность в точности результатов.

Станция INVIVO2

Baker Ruskinn InvivO2 это станции для культивирования клеточных культур, которые позволяют создавать необходимые физиологические условия для вашего эксперимента. Постоянный контроль параметров среды дает вам уверенность в точности результатов.

PhO2X Box – камера для культивирования клеток

PhO2X Box – камера для культивирования клеток в физиологических условиях. PhO2X Box состоит из регулятора подачи газа и собственно камеры для культивирования клеток, в которой можно разместить 6-, 12-, 24-, 96- луночные планшеты, а так же небольшие флаконы. Модуль камеры для культивирования можно разместить в любом инкубаторе, регулятор подачи газа располагается снаружи.

Система TisXell для культивирования 3D клеточных и тканевых конструкций

Компания QuinXell создала уникальную систему TisXell (двуосный биоректор) специально для тканевой инженерии и регенеративной медицины. Система позволяет создавать лучшие условия для высокой пролиферации клеточных культур в 3D по сравнению с традиционными методами.

Станции гипоксии SCI-tive

Обычные методы культивирования клеток включают в себя выделение клеток из физиологической среды и их культивирование, анализ в условиях bench-top,

Анаэробные и микроаэрофильные рабочие станции BugBox

BugBox – анаэробные и микроаэрофильные рабочие станции разработаны Baker Ruskinn специально для микробиологов.

Источник